甜菜种植技术之抗病材料筛选方法

甜菜种植技术之抗病材料筛选方法：室内筛选

(1) 温室育苗土：50％河沙和50％病土充分拌匀，装在大小为40cmX60cmXl0cm的塑料箱内。

(2) 试验设计：每箱播11行，每个材料1行，每行点播20粒种子，重复4次。每箱为1个区组，每个区组设1个抗病品种和1个感病品种作对照。

(3)播种时间：9月上中旬。

(4)光温条件：播后温室温度控制在18-20℃的品种或品系。

(5)BNYVV含量检测：11月中、下旬至12月中、下旬，将甜菜拨起，按行称重，洗净后压出根汁液，用盐酸缓冲液稀释(1：20)，取稀释液用酶联免疫法(ELISA)测定各参试材料根中的病毒(BNYVV)含量。根据BNYVV含量多少和苗期症状观察，确定病级。

(6)选留：参试材料的另一部分种子，同时进行母根培育，根据温室测定结果，选留抗性强的材料，每个入选材料留20-40株繁殖种子，第二年进入田间抗性鉴定。

甜菜种植技术之抗病材料筛选方法：田间鉴定

(1)自然病圃鉴定(开放式) 在中等病地上(3级病地)，在自然感病条件对参试材料进行抗病性、产量和含糖率鉴定。

(2)人工病圃鉴定(封闭式) 播种前，开沟定量且均匀撒入病土，造成均匀一致的发病环境。 自然病圃或人工病圃均在7月下旬至8月上旬进行田间调查，根据叶丛症状、植株病变程度确定病级，抗性分级标准。计算各材料的病株率和病情指数，人选无症状或轻微症状(病情指数低)的系号。在10月上旬收获期，对初选的每个系号，逐株检查丛根病症状的表现、维管束变褐程度、块根产量和含糖率。然后采集根尾汁液，用EIJSA方法检测BNYVV浓度。 根据田间病情观察调查结果，结合ELISA检测数据，选留症状轻微或无症状、ELISA值低、产量和含糖率高的系号作为选育抗病品种的基本材料。 温室或实验室鉴定筛选技术在欧美各国普遍应用，这些技术的应用，保证了传播媒介、病毒、温度和湿度的一致性。实验证明，当P.betas被BNYVV侵染时，P.betae的生活周期加快。这些方法筛选抗性基因比田间鉴定快得多，而且更可靠(Klith，1989)。由于田间生态环境差异，在许多情况下室内抗性与田间抗性结果并不一致。田间鉴定虽然费工、费时、试验面积庞大，易受环境因素的制约，但通过多点的、反复的试验，对育种家来说仍然是一个非常有用的方法，因为田间鉴定提供了温室和实验筛选中得不到的各参试材料的田间抗性、块根产质量和适应性等重要数据。只有室内筛选和田间鉴定紧密配合，甚至同步进行，获得的抗病材料(基因)将更可靠，更有实用价值。

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