持续发病猪场的饲料霉菌毒素的检测和分析_实验
近年来，在一些猪场，常常出现顽固性发病，如顽固性呼吸道疾病、顽固性腹泻或繁殖障碍，导致死淘率居高不下。调整免疫方案或使用药物控制效果不佳，实验室诊断也常无定论，给猪场带来很大的困扰。本文的服务团队在兽医服务过程中，经详细询问猪场病史、治疗以及疫苗免疫情况，并且进场进行全面现场诊断，发现这些猪场存在的共同问题就是其饲料品质差，可能存在霉菌毒素的污染。故提出应从管理和霉菌毒素问题进行着手解决，再进行合理的药物保健以及疫苗注射，这种控制思路在临床上起到了明显的控制效果。本文对这些猪场的临床发病情况和饲料样品的霉菌毒素检测结果进行综合分析，发现二者存在密切联系。现将分析结果和后续的控制方案报告如下。
1、猪场发病情况
本文所报道的发病猪场总计15个，存栏母猪100-500头，分别来自山东、云南、湖北、海南、江西、广西等。这些猪场在2014-2015年，持续数月出现临床发病，控制效果不良。其发病情况经临床诊断和相关的实验室检测，分成两类：其中12个猪场为保育仔猪顽固性呼吸道疾病，另3个猪场问题主要为新生哺乳仔猪疾病。其疾病发病过程以及治疗等详见表1。
2、饲料霉菌毒素检测
2.1饲料样品收集。经现场检查，从以上15家猪场抽取疑似霉菌毒素污染的配合饲料样品或原料玉米，样品数总计40份，分别检测黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的污染情况。
2.2霉菌毒素检测试剂盒。黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A定量ELISA（酶联免疫吸附试验）检测试剂盒均为南京柏发生物科技有限公司生产，产地江苏南京。
2.3霉菌毒素检测。首先分别按照检测试剂盒说明书的要求对样品进行前处理，获取各种霉菌毒素的检测溶液。然后分别按照黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素检测试剂盒说明书进行操作，并且制作标准曲线，根据标准曲线对检测样品中的霉菌毒素含量进行定量。
2.4检测结果
黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的判断标准和限量标准见表2。对40份样品的的检测结果进行分析，三种霉菌毒素均有检出，结果见表3。黄曲霉毒素B1的阳性率为52.5%，中度污染率和严重污染率分别为42.5%和30%；玉米赤霉烯酮检出阳性率为25%，中度污染率为25%；赭曲霉毒素A未超出限量标准。由检测结果看，所送检的样品黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮污染严重，但基本都是属于单一霉菌毒素污染，同时出现两种霉菌毒素超出限量标准的并不多见，这可能是由于霉菌毒素在形成过程中，具有的优势霉菌菌种不同而造成。
*本文所参考的限量标准源自相关国家标准：黄曲霉毒素：GB13078-2001；玉米赤霉烯酮：GB13078.2-2006；赭曲霉毒素：GB13078.2-2006。
比较玉米中黄曲霉毒素限量标准为50μg/kg，在豆粕等其他饲料中为20μg/kg，在本文检测中，统一将限量标准定位50μg/kg。
*超过最高限量标准定义为阳性
对不同猪场饲料所存在的霉菌毒素结果分析见表4。结果显示，所有15个猪场中有14家猪场存在霉菌毒素超出限量标准的问题。其中有47%的猪场饲喂过黄曲霉毒素B1超标的饲料，另有47%的猪场饲喂过玉米赤霉烯酮超标的饲料，饲喂黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮同时超标的猪场有1家，占7%。
*超过最高限量标准定义为阳性
3、临床控制措施及效果
根据猪场发病情况以及饲料霉菌毒素的检测情况给出综合性的方案。包括更换质量较好的玉米和饲料，或对玉米进行过风过筛，然后再使用高效微生态复合脱霉剂（“新霉吸安”，武汉回盛）2-3kg/T进行脱毒，连续使用1个月；使用氟苯尼考、多西环素、泰万菌素等抗生素进行治疗和保健进行继发感染的控制；进行抗体检测，根据抗体检测结果及时进行疫苗注射。经过以上措施，猪场的疫情均在1-2周内得到了控制，表现为发病率减少，死淘率降低，猪群精神采食等各项指标均逐步转为正常，明显挽回了经济损失。
4、小结与讨论
霉菌毒素是影响猪场健康的重要因素，霉菌毒素中毒可对猪只造成广泛而长期的危害。猪的重要霉菌毒素包括黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素、烟曲霉毒素和单端孢霉烯族的毒素（呕吐素、T-2毒素等）。黄曲霉毒素可致严重的肝脏损伤和免疫抑制，造成机体抵抗力明显下降，其它疾病容易发生且控制效果不良；玉米赤霉烯酮不仅影响繁殖，且可导致新生仔猪的免疫力下降和发育损伤，出现“八字脚”、先天性震颤等症状。大量研究证明，霉菌毒素是猪群临床发病的重要诱因。
本文通过分析15个猪场的临床发病和霉菌毒素污染情况，证实了猪场存在的顽固性呼吸道疾病、腹泻和繁殖障碍等问题与霉菌毒素超标具有一定的关联性，在疾病的治疗以及动物的保健和免疫中需要注意霉菌毒素问题。
在猪场遇到顽固性的疾病时，不能只从疾病本身去考虑解决方案，应根据发病情况和霉菌毒素超标情况，对疾病的控制和预防给出以下综合性方案：
4.1加强猪场管理，做好饲料收购储存工作，对原料尤其玉米进行物理方法去除霉菌毒素（过风过筛），弃用严重污染的饲料原料或对轻度污染的饲料使用高效脱霉剂；
4.2定期做好料槽的清洗工作和环境卫生工作，以防霉菌生长。
4.3定期对饲料仓库进行检查，对仓库的温度、湿度进行测定，并且定期开展饲料霉菌毒素的检测工作，以评价饲料质量。
4.4定期对猪场猪群的抗体进行检测，及时发现问题，如有可能最好做到病原学的检测工作，对猪群的健康状况做到心中有数，根据抗体检测结果，做好疫苗注射和药物保健预防工作。
4.5适时适当的时机，使用抗生素等进行预防保健，控制细菌感染。
