通过对单个和多个猪的口腔液样品使用qPCR的方式改进猪萎缩性鼻炎的防控措施

通过对单个和多个猪的口腔液样品使用qPCR的方式改进猪萎缩性鼻炎的防控措施 库百科养殖网讯:

马尔多纳多，德瓦尔斯，坎普罗东，里克尔梅，里埃拉

诊断海博莱，西班牙，美国，jaime.maldonado@hipra.com

摘 要

猪萎缩性鼻炎（AR）是由支气管败血波氏杆菌（BB）和多杀性巴氏杆菌D型（PMT）毒株引起的。活猪萎缩性鼻炎AR的监控通常是直接通过细菌培养、PCR或抗原检测鼻拭子（NS）检测。口液（OF）测
试提供了一个轻松收集定期猪群级疾病数据并进行了评估监测猪的各种细菌性和病毒性疾病的机会。据我们所知，以前在商业农场中没有发现使用关于Bb和PMT检测的报告。因此，本研究以确定通过qPCR方
式是否能从个别猪或成组猪中的样本中检测到Bb和PMT。

材料和方法

最初的两个试验开发中，作为检测Bb （flaA基因基因）和PMT（toxA基因）的常规方式PCRs1，2，分别使用于用SYBR Green I和熔解曲线分析实时格式（定量PCR）的方式进行检测。随着猪的病毒性和
细菌性呼吸道病原体渠道，分别用Bb和PMT的参考株进行敏感性和特异性分析评估。 钢笔样品中10生长肥育场来自46笔（20至25头猪，4-16周龄），并且包括一个与每栏4-7 NS（每群4-6笔）一个池的。个
别样本包括从两个成年母猪育种妊娠单元收集的相同数量的32OF and NS。群体中至少有一个样本检测阳性的定量PCR被认为是积极的Bb或PMT（如适用）。

结 果

PCR测定法成功地适应了qPCR的格式，允许通过敏感和特异的方法检测Bb和PMT，对其他猪病原体没有交叉反应，检测限是1-10 UFC/微升。

在10个生长完成的单元中，有7个中含有阳性的Bb，有1个含有阳性的PMT. 在2个养殖妊娠单位中，都是含有阴性PMT，有1个是含有阳性Bb。表1为每个目标和样品类型中含有阳性qPCR的汇总结果。在所
有情况下，在不同的比例中检测NS和OF都呈阳性（数据未示出）。只有一个母猪检测在NS和OF中都呈阳性Bb，没有测试呈阳性的PMT。

结论与讨论

这项研究表明，通过定量PCR方式检测，猪可能含有Bb和PMT的遗传物质。从相同的动物或动物群中OF 和NS的检出率是相似的。这些结果表明，OF可用于猪的监测AR，在采集过程中可减少劳动力和动
物应激性，并提供有关AR的繁殖和猪的健康状况的有价值的信息。

调查结果还表明，尽管Bb被认为是猪呼吸道的正常居住者，但是因为Bb的感染的可能性还是占了显著的比例。然而，值得注意的是，被检测的动物的数量较少，可能对结果也产生一定的影响。 尽管如此，
这些研究结果对进一步研究随着群体的生产数据的变化，使用描述的方法寻找在OF里 Bb和PMT中的患病率和疾病的发病率之间可能存在的联系有鼓励作用。

致 谢

米蕾亚布兰克，桑德拉阿朗索，米利亚姆奥里亚（疫苗免疫 海博莱 希罗娜 西班牙）。

参考文献：

1.哈勃等人，1999.皇家兽医微生物学，150：333-41.

2.坎普等人，1996.兽医诊断杂志，8：304-09.

3.国际兽医局 陆生生物手册。2012.章2.8.2.

4.普利克特等人，2010.动物卫生研究评论，11：207-16.