丹麦PRRSV2型造成重大的临床疾病的临床特征
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引言
蓝耳病毒世界范围内导致重要的繁殖与呼吸道疾病。在丹麦，约50%的猪为PRRSV血清阳性，有的感染1型和2型两种，有的感染其中一种。2010年11月，丹麦北部PRRSV2型爆发，临床的影响似乎比之前丹麦的PRRSV2型更严重。由于生产失败（死胎&木乃伊)，仔猪高死亡率，我们推测这可能是一种新的、毒力更强的，在丹麦进化的PRRSV毒株。本研究的目的是：1）通过实验接种幼龄猪进行病毒分离株的临床鉴定，与之前丹麦分离到的PRRSV2型毒株(DK-2010-10-13-1)比较其感染动力学；2）评估MLV2型疫苗对新的丹麦PRRSV2型分离住的保护力。
材料与方法
采集2010年11月的临床样本，获得病毒，命名为DK-2010-10-13-1，用传代细胞Marc-145分离毒株，并进行全基因测序。28头SPF级4周龄猪随机分组，对照组N=4（第一组），3个实验组（第2~4组）（N=8）。分别饲养在生物安全3级的环境中。第四组仔猪免疫(2 mLi.m.)Ingelvac® PRRS MLV疫苗(勃林格殷格翰动物保健)。4周后，在接种后0天，第一组用Eagle’s MEM鼻腔内模拟接种(i.n.)。第二组接种DK-1997-19407B 和第三组鼻腔内接种DK-2010-10-13-1。第四组用DK- 2010-10-13-1攻毒。本研究依据丹麦和欧洲实验室动物研究准则进行。记录每天的个体临床得分和个体直肠温度。所有猪分别在接种后0, 3, 7, 10, 14, 21, 28和30 天检测PRRS RT - PCR和血清分析。从肺组织病理学剖检采集样本进行病毒定量RT-PCR。
结果
所有的猪在实验室期间保持健康。剖检时，仅有轻微的病变。PRRSV通过实时RT-PCR检测所有接种过的猪（图1）。病毒血症在接种后第7天达到峰值，并且与非免疫组相比，免疫组（第4组）的明显要低些，而且病毒血症期要明显短很多（P=0.04）。组织病理学结果等待展示。
图1 实时RT-PCR测定血清中的病毒载量
结论与讨论
蓝耳分离株来自明显临床症状和明显的死亡率的猪群，但是在本实验感染中并未表现出这些症状，但是如果使用复制感染模型可能会更仅仅临床症状。全基因测序结果与其他的丹麦基因2型分离株很相似。我们的数据显示，田间疾病的严重性可能与其他很多因素关系更大，可能需要进一步研究鉴定PRRSV的毒力标签。另外，结果表明，免疫Ingelvac® PRRS MLV疫苗(勃林格殷格翰动物保健)减少病毒血症和排毒，于是有效地限制DK-2010-10-13-1病毒的影响，同样，希望有效地控制这种病毒及相关病毒的爆发。本发现与使用的该疫苗有效控制猪群感染的发现是一致的。
致谢
感谢 EU Grant n° 245141（欧洲一种新的工具和方法控制PRRSV）(PoRRSCon)的部分资金支持，感谢H. Nauwynck教授的协调与帮助。
