猪旋毛虫病酶联免疫吸附试验盒
品系用旋毛虫标准虫株,通过人工感染猪体的肌幼虫制成排泄-分泌抗原,再用旋毛虫单克隆抗体通过亲和层析法制成纯化抗原,包被于聚苯乙烯微量反应板,并配以1、2、3、4号试液和阴、阳性血清组装而成。用于诊断猪旋毛虫病。
【性状】抗原包被板无色,透明,干燥,无杂质吸附。1号试液为淡黄色澄明液体。2号试液为淡乳白色液体。3号、4号试液为无色透明液体。阴、阳性血清为淡黄色透明液体。
【作用与用途】用于诊断猪旋毛虫病的酶联免疫吸附试验。
【用法与判定】(1)样品准备被检血清作1:100稀释,血片作1:10稀释,阴、阳性血清作1:200稀释。(2)加样 反应板的每孔加检样2滴(约100uL),并设阴、阳性血清对照,室温静置2-3min。(3)反应甩掉被检液,每孔加1号试液1滴(约40uL),室温静置2-3min。(4)洗涤甩掉1号试液,每孔加2号试液1滴,立即用自来水或蒸馏水反复冲洗5次。(5)显色 拍干残液,每孔先加3号试液1滴,再加4号试液1滴,轻轻混匀,静置2-5min。(6)判定 在白色背景下,按下列标准判定:吸收度≤0.3、蓝色为阳性;吸收度≤0.08、无色为阴性。
肉眼观察 吸收度(450nm)
++++ 蓝色,明显深于阳性参照血清 <0.8
+++ 蓝色,深于阳性参考血清 ≤0.8
++ 蓝色,近于阳性参考血清 ≤0.5
+ 蓝色,浅于阳性参考血清 ≤0.3
一 无色或颜色浅于或接近阴性参考血清 ≤0.08
【注意事项】(1)每孔加入的1、2、3、4号试液的量要均等,最好加到孔中央,并严禁冻存。 (2)每孔加入2号试液后,必须用水充分冲洗,洗涤不彻底会影响结果。(3)第1号试液要密封保存,污染后不宜使用。第2、4号试液比较黏稠,要注意加足量。(4)室温低于25℃时,可适当延长每次反应时间,但最终判定结果,应在5min内完成(5)运输途中应避光、避高温和避碰撞。
【贮藏】在2-8℃有效期为10个月。
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