通过哺乳仔猪唾液样本监测PRRSV野毒株的流行
摘要
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)仍然是造成全球养猪业经济损失最严重的疾病之一,对北美、欧洲和亚洲的养殖户造成了重大的损失,因此很有必要对PRRSV进行有效的监测。根据以往累积的经验,要实现对PRRSV的控制,需要动物卫生专家建立便捷有效的方法对猪群PRRSV进行持续监测。本研究通过检测哺乳仔猪唾液样品,建立监测种猪群和生长猪群PRRSV流行的方法。
材料和方法
本研究选取4个已经接种PRRSV疫苗的商品猪猪场(每个猪场约12500头)。4个猪场的猪群都感染了地方性PRRSV,而且所有母猪已接种过2次或2次以上PRRSV弱毒苗(Ingelvac MLV,美国勃林格殷格翰动物保健有限公司,St.Joseph.MO)。收集600窝断奶前24小时的仔猪唾液样品和断奶后的母猪血清。随机抽取样品,用RT-qPCR检测PRRSV并测序,并用商品化ELISA试剂盒(由爱德士公司生产的PRRS X3抗体试剂盒和PRRS唾液抗体检测试剂盒)检测PRRSV抗体,以及用抗体同型特异性试验测定IgM、IgA和IgG。另外,对RT-qPCR检出的阳性样品进行PRRSV ORF5基因测序。
结果
600份血清样品的PRRSV RT-qPCR检测结果均为阴性,只有9份唾液样品(n=600)的RT-qPCR检测结果为PRRSV阳性。这些结果与2个诊断实验室的筛选测试(ISUVDL)和验证性测试(Tetracore)都匹配。抽取9份阳性唾液样品中的2份,对ORF5进行测序,确定为野毒感染。
阳性唾液样品和阴性唾液样品的抗体检测结果对比显示,阳性唾液样品的IgG S/P值(3.46)显著高于阴性唾液样品的S/P值(2.36,p=0.02)。同样,阳性唾液样品仔猪相对应的母猪,其血清样品的血清IgG(S/P平均值分别为1.73 vs 0.98;p<0.001)和S/P比值(S/P平均值1.97 vs 0.98;p<0.001),都显著高于阴性唾液样品仔猪相对应的母猪。
结论与讨论
PRRSV在猪群中呈地方性流行,本研究的数据表明,某种程度上,哺乳阶段仔猪循环隐性感染PRRSV,并将病原带至生长阶段,在断奶后运输和混群的过程中爆发疫情。研究表明,哺乳仔猪唾液样品的检测可以作为监测猪群PRRSV(感染,接种疫苗的或假定阴性种猪群)的高效、敏感的方法。
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